Wirus zapalenia wątroby typu C, ludzki herpeswirus 8 i rozwój białaczki osocza

Badania u pacjenta z białaczką osocza. Panel A pokazuje barwienie plazm plazmatycznych May-Grunwald-Giemsa (× 100). Nieprawidłowe komórki wykazywały morfologię plazmablastyczną: duże jądro o nieregularnym kształcie; cienka, jednorodna chromatyna i widoczne jądra; zmniejszona cytoplazma z niewielkim lub brakiem okołojądrowego hof. Liczby mitotyczne były częste. Panel B pokazuje specyficzność monoklonalnego kappa IgG dla białka rdzeniowego wirusa zapalenia wątroby typu C (HCV). Monoklonalny kappa IgG w surowicy pacjenta oddzielono za pomocą ładunku poliklonalnej immunoglobuliny (Ig) i beta globulin na żelu agarozowym (Paragon SPE-II, Beckman Coulter). Części żelu odpowiadające każdej frakcji białkowej zostały ostrożnie pocięte i białka zostały wymyte. Czystość każdej frakcji białkowej została potwierdzona za pomocą analizy immunofiksacji (Titan Immunogel, Helena Biosciences), a następnie oczyszczona immunoglobulina została poddana rekombinowanemu testowi immunoblot (RIBA III, Ortho Diagnostic Systems), który wykrywa immunoglobulinę skierowaną przeciwko fragmentom niestrukturalnych białek HCV NS-3, NS-4 i NS-5 oraz fragment C22-3 rdzenia białka. Dwie oczyszczone poliklonalne frakcje immunoglobulin rozpoznały białka NS-3 HCV i NS-4. Monoklonalna frakcja kappa IgG rozpoznała białko rdzeniowe HCV; także słabo rozpoznawał NS-4, najprawdopodobniej z powodu nakładania się z jedną poliklonalną frakcją immunoglobulinową. Frakcja beta globulin stosowana jako kontrola negatywna nie rozpoznała peptydów HCV. Panele C i D pokazują badania immunofluorescencji. Plazmoplasty inkubowano z pierwotnym przeciwciałem – przeciwciałem kontrolnym lub przeciwciałem swoistym dla białka rdzeniowego HCV (Afforeore Bioreagents) lub swoistym dla ludzkiej fazy produkcyjnej ORP 59 (HHV-8) ORF 59 lub ORF K8.1 (Advanced Biotechnologies) – oraz następnie z drugorzędowym przeciwciałem wyznakowanym izotiocyjanianem fluoresceiny. Obrazy pokazują okołojądrowe, globularne fluorescencje charakterystyczne dla HCV. Powiększenie wyniosło × 100 dla HCV i × 40 dla HHV-8.
Rola wirusa zapalenia wątroby typu C (HCV) i ludzkiego herpeswirusa 8 (HHV-8), dwóch wirusów z tropicami komórek B, w proliferacji komórek B1 jest zilustrowana przez następujący niezwykły przypadek białaczki osocza. W 1995 r. 32-letni mężczyzna z wirusem zapalenia wątroby typu A i HCV, który jednak nie przeszedł testu na obecność wirusa zapalenia wątroby typu B i wirusa niedoboru odporności, został przyjęty do szpitala z powodu wstrząsu septycznego, obustronnego zapalenia płuc i hepatosplenomegalii. Poziom hemoglobiny wynosił 8,9 g na decylitr; liczba białych krwinek wynosiła 26,6 × 109 na litr z 50-procentowymi plazmoblastami (Figura 1A), 41% neutrofilami, 7% limfocytami i 2% monocytami; liczba płytek krwi wynosiła 99 x 109 na litr. Szpik kostny zawierał 47 procent plazmoblastów. Poziom białka wynosił 57 g na litr, z 15,5 g na litr gamma globulin i monoklonalnym IgG kappa w surowicy i moczu. Antybiotyki i chemioterapia (cyklofosfamid, doksorubicyna, winkrystyna i prednizolon) zostały podane, ale pacjent, który miał ciężką trombopenię, zmarł na krwotok mózgowy w 15 dniu.
Wszystkie plazmaflasty były CD38 + CD138 + CD56-CD28- i dodatnie dla IgG kappa. Były to również CD19 + CD45 +++, fenotyp zwykle występujący w reaktywnych proliferacjach komórek plazmatycznych Jednak analiza cytogenetyczna i fluorescencyjna in situ hybrydyzacji potwierdziła monoklonalność i ujawniła izolowaną translokację t (9; 14) (p13; q32), która zfuzowała geny PAX-5 i IgH. Ta translokacja występuje w przypadkach chłoniaka limfoplastakoidowego, z których jedna trzecia jest związana z HCV2,3 i była opisana w komórkach nowotworowych u pacjenta z HCV-dodatnim chłoniakiem pierwotnym – stanem związanym z HHV-8.4.
Badania retrospektywne były zgodne z procesem opartym na HCV prowadzącym do białaczki osocza. Immunoblotting wykazał, że monoklonalny kappa IgG skierowany był przeciwko białku rdzeniowemu HCV (Figura 1B). Pacjent miał wiremię HCV (typ 1a) i wiremię HHV-8 (podtyp C ). Badania reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkryptazą (PCR) i immunofluorescencji wykazały, że jego plazmaflasty były zakażone HCV i wytwarzały białko rdzeniowe HCV (Figura 1C). Immunofluorescencja i ilościowe badania PCR w czasie rzeczywistym (TaqMan) wykazały, że 100% plazmoblastów było produktywnie zakażonych HHV-8 (.300 kopii wirusowych na podmuch) (Figura 1D).
U naszego pacjenta HCV i HHV-8 mogły działać synergistycznie, powodując białaczkę z komórek plazmatycznych, poprzez następującą sekwencję zdarzeń: oligoklonalna ekspansja limfocytów B kierowana przez rdzeń HCV; Zakażenie wirusem HCV rdzenia specyficznego dla HCV – klon komórek B i ekspansja monoklonalna specyficznego dla rdzenia klonu wytwarzającego rdzeń; ekspansję monoklonalnego plazmidu po zablokowaniu różnicowania plazmacitycznego w wyniku przegrupowania PAX-5; i przyspieszona ekspansja plazmablastów po infekcji HHV-8 lub reaktywacja utajonego zakażenia HHV-8. Ponieważ pacjenci mogą korzystać z terapii antywirusowej, 5 proponujemy, że w przypadkach nietypowej prezentacji choroby linii B należy zbadać obecność wirusów transformujących komórki B-tropic.
Sylvie Hermouet, MD, Ph.D.
Center Hospitalier Universitaire de Nantes, 44093 Nantes, Francja
sylvie. [email protected] inserm.fr
Isabelle Corre, Ph.D.
INSERM Unité 463, 44093 Nantes, Francja
Michelle Gassin, MD
Edith Bigot-Corbel, Ph.D.
Center Hospitalier Universitaire de Nantes, 44093 Nantes, Francja
Claudia A. Sutton, Ph.D.
James W. Casey, Ph.D.
Cornell University, Ithaca, NY 14853
5 Referencje1. Pagano JS. Wirusy i chłoniaki. N Engl J Med 2002; 347: 78-79
Full Text Web of Science MedlineGoogle Scholar
2. Iida S, Rao PH, Nallasivam P, i in. Translokacja chromosomalna t (9; 14) (p13; q32) związana z chłoniakiem limfoplazmocytoidalnym obejmuje gen PAX-5. Blood 1996; 88: 4110-4117
Web of Science MedlineGoogle Scholar
3. Silvestri F, Barillari G, Fanin R i in. Wpływ infekcji wirusem zapalenia wątroby typu C na cechy kliniczne, jakość życia i przeżycie pacjentów z chłoniakiem limfoplazmocytowym / immunocytoma. Ann Oncol 1998; 9: 499-504
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
4. Ichinohasama R, Miura I, Kobayashi N, i in. Pierwotny chłoniak z wysiękowego guza typu Herpesvirus typu 8 związany z przegrupowaniem genu PAX-5 i wirusem zapalenia wątroby typu C: opis przypadku i przegląd piśmiennictwa. Am J Surg Pathol 1998; 22: 1528-1527
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
5 Hermine O, Lefrere F, Bronowicki JP, i in. Regresja chłoniaka śledziony z limfocytami kosmków po leczeniu zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu C. N Engl J Med 2002; 347: 89-94
Full Text Web of Science MedlineGoogle Scholar
(13)
[przypisy: drożdżówka kalorie, stomatolog bemowo, ośrodki uzależnień od alkoholu ]
[hasła pokrewne: dyżury aptek rawa mazowiecka, drożdżówka kalorie, gencjana na włosy ]