Odrębny członek rzędu Rickettsiales, Bartonella bacilliformis, może wywoływać zmiany chorobowe (verruga peruana), które są nieodróżnialne od tych wywołanych przez angiomatozę, i to doprowadziło do sugestii, że może to być przyczyną tej choroby.4, 51 Nie ma Dane sekwencji 16R rRNA dostępne dla Bart. bacilliformis; w związku z tym jego związek z BA-TF pozostaje niejasny. B. abortus … [Read more…]
Nasze powiązanie sekwencji BA-TF z tkankami od pacjentów z angiomatozą bakteryjną zostało wzmocnione przez niezależne przetwarzanie i amplifikację różnych próbek w różnych laboratoriach. Ponadto, próbki tkanki wewnętrznej od pacjentów bez angiomatozy naczyń włosowatych nigdy nie dały widocznego produktu amplifikacji. Pomimo małej liczby różnic nukleotydowych między BA-TF i sekwencją rRNA 16S pacjenta 3 i pojedynczego klonu … [Read more…]
Ich tożsamość była tajemnicą. Zastosowaliśmy technikę, która omija absolutną potrzebę wyizolowania lub wzrostu organizmu związanego z chorobą, ale mimo to może ujawnić swój związek filogenetyczny. Takie relacje mogą przewidywać ważne i użyteczne cechy organizmu, ponieważ ewolucyjnie powiązane organizmy powinny mieć pewne cechy. Angiomatoza naczyń włosowatych jest dobrze zdefiniowaną, coraz powszechniejszą infekcją skóry i narządów wewnętrznych, … [Read more…]
Sekwencje 16S rRNA Podobieństwa między nowym organizmem, BA-TF i wybraną Rickettsią i innymi eubakteriami. Zoptymalizowane dopasowanie sekwencji przygotowano z użyciem sekwencji 16S rRNA o długości 480 pz BA-TF (z wyłączeniem sekwencji starterów) i sekwencji innych organizmów. Te dopasowania zostały użyte do skonstruowania drzewa filogenetycznego zgodnie ze standardowymi technikami 36, 37. Jak pokazano na Fig. 3, … [Read more…]
Mieszaniny reakcyjne bez matrycy DNA, jak również z DNA z tkanek migdałków od dwóch pacjentów i tkanki śledziony od pacjentów bez angiomatozy, były konsekwentnie ujemne. Brak wykrywalnego produktu z bakteryjnie zanieczyszczoną migdałkową tkanką wykazał specyficzność tych starterów (ryc. 2, ścieżka 8). Analiza nowej sekwencji rRNA 16S stwierdzonej u niepowiązanych pacjentów z bakteriami z Angiomatosis Aby … [Read more…]
Wcześniejsze badania wykazały, że ilości pikogramów rDNA 16S E. coli można wykryć przy użyciu tych primerów jako sond hybrydyzacyjnych w obecności dużego nadmiaru eukariotycznego genomowego DNA.26 Figura 2. Figura 2. Elektroforeza w żelu agarozowym z fragmentów rDNA z amplifikacją PCR 16S z ekstraktów DNA tkankowego. Szerokopasmowe eubakteryjne primery 16S rDNA – p11E i p13B – … [Read more…]
Każda reakcja zawierała 20 pmoli każdego startera i standardowe ilości odczynników Gene-Amp (Perkin-Elmer-Cetus), z tym wyjątkiem, że zastosowano 2 mM chlorek magnezu do amplifikacji z ekstraktami tkanki zatopionej w parafinie. Ta mieszanina została napromieniowana światłem ultrafioletowym, aby zmniejszyć zanieczyszczenie odczynników. Do probówek dodano warstwę sterylnego oleju mineralnego, a następnie szablon DNA. Cykle PCR obejmowały minutę … [Read more…]
Nie miała żadnych zmian skórnych. Biopsja pachwinowego węzła chłonnego wykazała cechy histologiczne odpowiadające nabłonkowemu angiomatozie. Skupiska pałeczek były widoczne na barwieniu Warthin-Starry. Ekstrakcja DNA DNA wyodrębniono z zamrożonego guzka śledziony i zamrożonego fragmentu śledzionowego węzła chłonnego z pacjenta 1, zamrożonej próbki szpiku kostnego od pacjenta 2, zatopionej w parafinie, utrwalonej w formalinie tkanki ze zmiany … [Read more…]
Przy użyciu szerokozakresowych eubakteryjnych primerów 16S rDNA zamplifikowano, sklonowano i zsekwencjonowano część eubakteryjnego genu rSNA 16S bezpośrednio z tkanki zainfekowanej domniemanym czynnikiem etiologicznym. Późniejsze analizy tej sekwencji i badanie zainfekowanych tkanek od innych pacjentów sugerują, że angiomatoza jest spowodowana przez organizm przypominający riketsję, który jest najbardziej zbliżony do Rintalimaea quintana. Metody Pacjenci Figura 1. Figura … [Read more…]
Bakteryjna angiomatoza (zwana również angiomatozą nabłonkową) i choroba drapania kota są ważnymi zaburzeniami klinicznymi, które uważa się za zakaźne na podstawie bezpośredniej wizualizacji drobnoustrojów w chorych tkankach. Ponieważ te organizmy nie mogą rosnąć w sposób powtarzalny, tożsamość przypuszczalnego patogenu lub patogenów pozostaje nieznana. Bakteryjna angiomatoza jest odrębną chorobą rozrostową naczyń pierwotnie opisaną w skórze i … [Read more…]